A clonagem (derivado do grego κλων, que significa "retoño") pode se definir como o processo pelo que se conseguem cópias idênticas de um organismo, célula ou molécula já desenvolvido de forma asexual.[1]
Devem-se tomar em conta as seguintes características:
A clonagem molecular utiliza-se em uma ampla variedade de experimentos biológicos e as aplicações práticas que vão desde a tomada de impressões digitais a produção de proteínas a grande escala.
Na prática, com o fim de amplificar qualquer sequência em um organismo vivo, a sequência a clonar tem que estar vinculada a uma origem de replicação; que é uma sequência de DNA
-Transfección: Introduz-se a sequência formada dentro de células.
-Selecção: Finalmente seleccionam-se as células que têm sido transfectadas com sucesso com o novo DNA.
Inicialmente, o DNA de interesse precisa ser isolado de um segmento de DNA de tamanho adequado. Posteriormente, dá-se o processo de ligación quando o fragmento amplificado se insere em um vetor de clonagem: O vetor se linealiza (já que é circular),usando enzimas de restrição e a seguir se incuban em condições adequadas o fragmento de DNA de interesse e o vetor com a enzima DNA ligasa.
Depois da ligación do vetor com o insiro de interesse, produz-se a transfección dentro das células, para isso as células transfectadas são cultivadas; este processo, é o processo determinante, já que é a parte na que vemos se as células têm sido transfectadas exitosamente ou não.
Teremos que identificar por tanto as células transfectadas e as não transfectadas, existem vetores de clonagem modernos que incluem marcadores de resistência aos antibióticos com os que só as células que têm sido transfectadas podem crescer. Há outros vetores de clonagem que proporcionam cor azul/ alvo cribado. De modo, que a investigação das colónias é necessária para confirmar que a clonagem se realizou correctamente.
Clonar uma célula consiste em formar um grupo delas a partir de uma sozinha. No caso de organismos unicelulares como bactérias e fermentos, este processo é muito singelo, e só requer a inoculación dos produtos adequados.
No entanto, no caso de cultivos de células em organismos multicelulares, a clonagem das células é uma tarefa difícil, já que estas células precisam umas condições do médio muito específicas.
Uma técnica útil de cultivo de tecidos utilizada para clonar diferentes linhagens de células é o uso de aros de clonagem (cilindros).
De acordo com esta técnica, um agrupamento de células unicelulares que têm sido expostas a um agente mutagénico ou a um medicamento utilizado para propiciar a selecção se põem em uma alta dilución para criar colónias isoladas; a cada uma provindo de uma sozinha célula potencialmente e clónicamente diferenciada.
Em uma primeira etapa de crescimento, quando as colónias têm só umas poucas células; submergem-se aros estéreis de poliestireno em gordura, e põem-se sobre uma colónia individual junto com uma pequena quantidade de tripsina .
As células que se clonam, se colectam dentro do aro e se levam a um novo contêiner para que continue seu crescimento.
A clonagem terapêutica ou andropatrica tem fins terapêuticos, e consiste em obter células mãe do paciente a tratar, atendendo ao seguinte experimento: Apanha-se uma célula somática qualquer do paciente a tratar, se isola o núcleo com os cromosomas dentro e se elimina todo o demais.
Por outro lado, obtemos um óvulo sem fecundar e extraímos seu núcleo com seus cromosomas, para assim introduzir neste o núcleo isolado anteriormente da célula somática. A seguir estimula-se o óvulo com o núcleo começando assim a divisão celular do embrião clonado.
Este embrião será um clon do paciente a tratar. Deixamos que o embrião se desenvolva até chegar à fase finque: o blastocisto.
Nesta fase extraímos a célula mãe da massa celular obtida que tem o mesmo DNA que o paciente, e portanto não causará rejeição quando se injecte.
Um exemplo deste tipo de clonagem é a clonagem da ovelha Dolly (5 de julho de 1996 - 14 de fevereiro de 2003).
A transferência nuclear de células somáticas pode utilizar-se também para criar um embrião clonado. O objectivo não é clonar seres humanos, senão (como já temos dito anteriormente) cosechar células mãe que podem ser utilizadas para estudar o desenvolvimento humano e realizar estudos sobre doenças de interesse.
A clonagem de um organismo é criar um novo organismo com a mesma informação genética que uma célula existente. É um método de reprodução asexual, onde a fertilización não ocorre. Em termos gerais, só há um progenitor envolvido. Esta forma de reprodução é muito comum em organismos como as amebas e outros seres unicelulares, ainda que a maioria das plantas e hongos também se reproduzem asexualmente.
Também se inclui a obtenção de gémeos idênticos de maneira natural ou artificial. A forma natural considera-se como uma alteração espontánea durante o desenvolvimento embrionario, se ignorando sua causa, ainda que existe uma correlação familiar estatisticamente significativa. O método artificial realiza-se por separação mediante manipulação dos blastómeros, debilitando as uniões celulares com tripsina e médio pobre em Ca2+, ou manualmente partindo o blastocisto ao meio (muito corrente em vacas).
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A clonagem humana é a criação de uma cópia geneticamente idêntica a uma cópia actual ou anterior de um ser humano. Existem três tipos de clonagem humana:
A clonagem andropatrica implica a clonagem de células de um indivíduo adulto para seu posterior uso em medicina (como temos visto no apartado de clonagem andropatrica).
A clonagem reproductiva implicaria a completa clonagem de um ser humano. Este tipo de clonagem não se realizou ainda em humanos.
A clonagem hidroplasmotica implica a configuracion da clonagem nos humanos dentro do mecanismo hidroélectrico que este constitui.
Um quarto tipo de clonagem seria a chamada clonagem de substituição que seria uma combinação da clonagem reproductiva e a clonagem terapêutica. Neste tipo de clonagem produzir-se-ia a clonagem parcial de um tecido ou uma parte de um humano necessária para realizar um transplante.
Em janeiro de 2008, anunciou-se que se criaram 5 embriões humanos mediante o DNA das células da pele de adultos com vistas a proporcionar uma fonte viável de células mãe embrionarias; valendo-se da mesma técnica que deu origem à ovelha Dolly, cientistas da empresa californiana Stemagen Corporation (com sede na Jolla, Califórnia), encabeçados por Andrew French, têm empregado as células da pele de dois varões adultos bem como os óvulos de três mulheres jovens (entre 20 e 24 anos) que se estavam a submeter a um tratamento de fertilidad. Um dos doadores de pele foi Samuel Wood, director executivo da companhia e coautor do trabalho. Mas propôs-se o facto de que isto fosse ético e legal, de maneira que foram destruídos.[2]
O objectivo da investigação da clonagem humana nunca tem sido o de clonar pessoas ou criar bebés de reserva.[3] A investigação tem como objectivo obter células mãe para curar doenças.[4]
Claro que se publicaram os resultados da investigação sobre clonagem de animais e humana para obter células mãe e, ao igual que o resto das descobertas científicas, estas publicações estão disponíveis a nível mundial.
Estes indivíduos não trabalham para nenhuma universidade, hospital ou instituição governamental.[cita requerida] Pelo geral, a comunidade científica a nível mundial opôs-se fortemente a qualquer hipótese de clonar a um bebé.
Segundo John Kilner, presidente do Centre for Bioethics and Human Dignity nos Estados Unidos, "A maioria das investigações publicadas demonstra que a morte ou a mutilación do clon são resultados muito prováveis na clonagem de mamíferos."[cita requerida]
Ninguém sabe até que ponto avançou a clonagem humana realmente em bebés. Em abril de 2002, o cientista italiano Dr. Severino Antinori fez um comentário improvisado a um jornalista, afirmando que três mulheres estavam grávidas de um embrião clonado. A partir de então apartaram-lhe de embaixo das luzes do palco e nunca mais teve oportunidade de confirmar ou negar esse comentário. Ainda que não fosse verdade, ou a tentativa tivesse falhado, dá a sensação de que Antinori pretenda tentar clonar um bebé humano em um futuro próximo.[cita requerida]
Os médicos avaliam os riscos da clonagem humana como muito elevados.[cita requerida]
"Submeter à clonagem por parte dos humanos não significa assumir um risco desconhecido, senão prejudicar às pessoas conscientemente", afirma Kilner.[cita requerida]
A maioria dos cientistas é da mesma opinião.[cita requerida] A grande maioria das tentativas de clonagem de um animal deram como resultado embriões deformados ou abortos depois da implantação.[cita requerida] Defendem que os poucos animais clonados nascidos apresentam malformaciones não detectables através de análise ou testes no útero, por exemplo, as deformações no revestimento dos pulmões.
Em 1996, foi clonada a ovelha Dolly. Foi o primeiro mamífero clonado a partir do DNA derivado de uma adulta em vez de ser utilizado o DNA de um embrião. Mas ainda que Dolly tenha uma aparência saudável, questiona-se a possibilidade de que envelhecesse dantes que uma ovelha normal.[cita requerida] Ademais foram necessários 277 embriões para produzir este nascimento.
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A clonagem de espécies extintas, tem sido um sonho para muitos cientistas.Um dos objectivos previstos para a clonagem foi o mamut lanudo, mas as tentativas de extrair DNA de mamuts congelados não têm tido sucesso, ainda que uma equipa russa-japonês está a trabalhar em isso.
Em 2001, uma vaca chamada Bessie deu a luz a um gaur ( um bisonte índio) clonado da Ásia, uma espécie em perigo, mas o ternero morreu após dois dias.
Em 2003, um banteng (tipo de touro) foi clonado com sucesso, ademais também foram clonadas com sucesso três feras da África a partir de embriões congelados. Estes sucessos têm dado esperanças sobre a possibilidade de que outras espécies extintas possam ser clonadas. De cara a esta possibilidade; as mostras de tecidos do último bucardo (cabra montesa) foram congelados rapidamente depois de sua morte.
Os pesquisadores também estão a considerar a clonagem de espécies em perigo de extinção como o panda gigante, o ocelote, e guepardos.
Em 2002, os genetistas no Museu Australiano anunciaram que tinham replicado o DNA do Tigre de Tasmania, extinto faz 65 anos com a reacção em corrente da polimerasa. No entanto no ano 2005, tiveram que parar o projecto já que as células não se tinham conservado bem.
Um dos obstáculos na tentativa de clonar espécies extintas é a necessidade de manter o DNA em perfeito estado, muito bem conservado.
Depois da intervenção realizada pelos cientistas Ian Wilmut e Keith Campbell na Ovelha Dolly, o Vaticano publicou um documento titulado Reflexões sobre a clonagem. Neste documento dá-se uma condenação firme de qualquer experimentación com seres humanos ou com suas células com fins de clonagem humana:[5]
A condenação que a Igreja católica faz da clonagem humana parte do facto de que tal técnica cientista manipula e exclui a crença católica da relacionalidad e complementariedad próprias da procriação humana, instrumentalizaría ao embrião e à mulher que tem de levar ao indivíduo clonado em seu útero e perverteria as relações fundamentais da pessoa humana (as próprias do parentesco) desde o ponto de vista da religião católica. Unido a todo isso, o documento indica que a clonagem reafirma a opinião religiosa de que as pessoas podem dominar a existência de outras inclusive programando sua identidade biológica, coisa que nenhuma pessoa tem o direito de fazer. Finalmente, a Igreja católica sustenta a teoria de que permitir a clonagem humana implicaria uma violação dos princípios fundamentais dos direitos do homem: a igualdade entre os seres humanos e a não discriminação.[5]